产品货号:
GS0095
中文名称:
柱式植物总RNA提取试剂盒
英文名称:
Spin Column Plant Total RNA Purification Kit
产品规格:
50次|100次
发货周期:
1~3天
产品价格:
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植物含有多糖、多酚等次生代谢产物,这些物质在细胞裂解后可与RNA紧密结合形成难溶复合物或胶冻状沉淀,很难将其去除。本公司针对这一难题,研发了一种新型柱式植物总RNA抽提试剂盒,适用于各种植物样品RNA的快速提取。裂解液可有效解决多酚物质易氧化,多糖化合物与核酸难分离等难题。
使用吸附柱对RNA进一步纯化,操作简单方便,避免乙醇漂洗,RNA沉淀丢失等问题。所提取的RNA不含多糖、多酚物质污染,可用于构建cDNA文库、RT-PCR、Northern转印分析、Poly(A) mRNA纯化、体外翻译等实验。
- RNA纯度高,无多糖、多酚物质污染。
- 适用各种富含多糖、多酚物质的植物材料。
- 操作简单方便,全过程可在30分钟之内完成。
组分 | 50次 | 100次 |
Buffer Rlysis-PG | 25mL | 50mL |
GT Solution | 18mL | 36mL |
NT Solution | 6mL | 12mL |
DEPC-treated ddH2O | 2.5mL | 5mL |
吸附柱及收集管 | 50套 | 100套 |
保存:4℃
- 自备试剂:无水乙醇、DEPC等。
- 按瓶身标签说明在GT Solution、NT Solution中加入相应量的无水乙醇,混匀后在瓶身做好标记。于室温密封保存。每次使用后将瓶盖盖紧,以保持GT Solution、NT Solution中的乙醇含量。(18mL GT Solution中应加入12mL无水乙醇,36mL GT Solution中应加入24mL无水乙醇;6mL NT Solution中应加入24mL无水乙醇,12mL NT Solution中应加入48mL无水乙醇。)
- 每次用前请检查Buffer Rlysis-PG是否有沉淀,如有沉淀请于37℃淀后使用。
- 取450μL Buffer Rlysis-PG加入1.5mL RNase-free的离心管中备用。
- 取25~50mg植物组织用液氮研磨成粉末,加到上述1.5mL离心管中,立即震荡混匀,室温放置5min。
- 液氮研磨过程中要避免样品融化,使用的研钵与药匙等工具应事先用液氮预冷。研磨后的样品应迅速加入裂解液中震荡混匀,避免RNA降解。
- 样品转入离心管时避免带入液态氮,因为液氮在封闭的离心管中迅速转变成气体可能引起离心管的爆裂,请注意安全。
- 液氮研磨过程中要避免样品融化,使用的研钵与药匙等工具应事先用液氮预冷。研磨后的样品应迅速加入裂解液中震荡混匀,避免RNA降解。
- 12000rpm 4℃离心3min,将上清移至1.5mL RNase-free的离心管中。
- 加入1/2体积无水乙醇,充分混匀。
- 即使出现沉淀也不要离心。
- 将吸附柱放入收集管中,用移液器将溶液全部加至吸附柱中,静置1min,室温12000rpm离心1min,倒掉收集管中废液。
- 如需彻底清除RNA当中的DNA,可以搭配RNase-Free DNA清除试剂盒(货号:GS2266)。
- 将吸附柱放回收集管中,加入500μL GT Solution,静置1min,室温10000rpm离心1min,倒掉收集管中废液。
- GT Solution使用前请检查是否按比例加入无水乙醇。
- 将吸附柱放回收集管中,加入500μL NT Solution,静置1min,室温10000rpm离心1min,倒掉收集管中废液。
- NT Solution使用前请检查是否按比例加入无水乙醇。
- 将吸附柱放回收集管中,12000rpm离心2min。
- 此步绝不可省略,否则残余的乙醇会严重影响得率和后续实验。
- 将吸附柱打开盖子于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残留的乙醇,乙醇的残留会影响RNA的产量和后续的实验。
- 此步绝不可省略,否则残余的乙醇会严重影响得率和后续实验。
- 将吸附柱放入RNase-free的1.5mL离心管中,在吸附膜中央加入30~50μL DEPC-treated ddH2O,静置2min,12000rpm离心2min,将所得到的RNA溶液置于-70℃保存或用于后续试验。
- RNA在-70℃保存,以防降解,或保存在RNA保存液(货号:GS2322)中。
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